细胞描述：
K-562来源于一位临终的53岁女性慢性髓性白血病患者的胸水。细胞被归入高度未分化的粒性白细胞类。Anderson等对其表面膜性质的研究表明，K-562是一株人类红白血病细胞。K-562母细胞是多能性，造血恶性细胞，它能自发分化成可识别的红血球祖细胞、粒性粒细胞、单核细胞等。Dimery等将多种K-562亚系分为3类(A,B,C)，此株细胞最接近B类，出现费城染色体，但频次较低，在15个分裂中期检测中未检测到。它是EBNA阴性的。
该细胞为K562细胞通过慢病毒转染的方式携带luc基因。
细胞为稳定转染Luc的细胞，随细胞传代次数的增加，其Luc荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。
细胞特性：
1） 来源：人，女性，53岁， 骨髓
2） 形态：淋巴母细胞样；圆形，悬浮生长
3） 规格：1×106cells
4） 培养条件：IMDM+10%FBS+1%P/S (推荐货号AW-MC009)
空气，95%；二氧化碳，5%
37℃
5） 注意事项：
a) 该细胞为悬浮细胞，根据培养经验以及客户的反馈，传代时使用【半换液法】对细胞状态较为有利，因此我库建议您使用【半换液法】进行传代。同时，您在收到细胞后，请不要通过离心的方式收集细胞，可以直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液，然后将细胞吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中继续培养即可。
b) 细胞对血清质量较为敏感，我库建议您使用进口大品牌优质血清进行培养。
c) 该细胞对细胞密度较为敏感，培养、传代时请注意保持细胞密度在合适的范围。细胞接种密度10万个/mL，维持密度10万-100万个/mL.
细胞接收后的处理：
1） 收到细胞后，活细胞首先观察培养瓶是否完好，培养液是否漏液，培养基是否浑浊；冻存细胞是否干冰已挥发完，冻存管盖是否脱落，破碎，若有这类情况，请务必拍照记录，并于收货24h内与我们联系。
2） 细胞处理：
复苏的细胞：如果是T-25培养瓶活细胞，收到后请用75%的酒精对培养瓶表面进行消毒处理，然后转入培养箱中静置2~3h后再进行后续处理。
备注：运输用的培养基不宜再次用来培养细胞，请按照说明书新配置完全培养基来培养细胞。
冻存细胞：如果是干冰运输的冻存细胞，收到后请立即转入液氮存储或者短暂（24h）放置-80度冰箱保存，或者直接进行细胞复苏。
细胞复苏、传代及冻存流程参考
1、 细胞复苏
1） 配制完全培养基：基础培养基+胎牛血清+双抗（特殊培养基特殊配置）；
2） 细胞复苏：取5ml完全培养基于15ml离心管中，37℃水浴锅预热，从液氮管（或者-80度冰箱）中快速取出冻存的细胞，放入37℃水浴锅中，摇晃使快速化冻（1min左右），然后将化冻的细胞和预热的培养基，移入超净工作台中，化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3） 吸弃上清，得到细胞沉淀，用2ml完全培养基轻轻重悬细胞，加入到T25培养瓶中，做好标记，放入37℃，5%CO2饱和适度培养箱中培养（培养皿复苏效果更好）；
4） 24h后，观察细胞贴壁情况（未贴壁的即为死细胞--针对贴壁细胞），吸弃旧培养基，加入新鲜的预热（室温或37℃）的完全培养基，继续培养。
2、 细胞传代（悬浮细胞不用胰酶消化的过程，直接进行离心收集细胞沉淀或者半量换液）
1） 待细胞生长到80% -90%汇合度时，吸弃旧的培养基，加入1ml无菌PBS润洗一次，以去除残余的培养基及血清（血清含有胰酶的抑制因子），然后加入1ml 0.25%胰酶，消化 （10s~2min不等，不同细胞消化时间不同，以细胞收缩变圆为准，第一次消化，建议镜下实时观察消化，以确定您实验室对该细胞消化的最优条件 ，避免消化过度）；
2） 加入1ml完全培养基（含FBS）终止消化，轻轻拍打，使细胞脱落下来成单个细胞悬液，收集细胞于15ml无菌离心管中，1000rpm，离心5min；
3） 收集细胞沉淀，完全培养基重悬，一分为二（可根据细胞生长速度调整比例），分别加入到2个新的培养瓶中，做好标记，放入培养箱中培养。
3、细胞冻存
1） 按照细胞传代方法，在超净工作台内消化收集细胞沉淀，取少量细胞用于计数；
2） 用预冷的1ml冻存液（90% 完全培养基+10% DMSO）或者无血清细胞冻存液重悬细胞，加入到1.2ml冻存管中，密度为1*106个/ml。
3） 放入程序冻存盒，-80℃过夜后，转入液氮长期保存。
